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FC技术FC流式细胞技术( Flow Cytometry, FC)是一种对液流中排成单列的细胞或其它生物微粒(如微球、细菌、小型模式生物等)逐个进行快速定量分析和分选的技术。 细胞胞内染色操作流程1.制备单细胞悬液; 2.PBS洗涤两次后加入固定剂; 3.洗涤之后加入对应的缓冲液,重悬细胞静置10分钟; 4.[可选]阻断Fc受体(10-20分钟); 5.加入抗体,2-8°C孵育(30分钟); 6.用对应的缓冲液洗涤1-2次(每次5分钟,400-600g); 7.如非荧光染料直标抗体加入荧光二抗,2-8°C孵育(30分钟); 8.用对应的缓冲液洗涤1-2次(每次5分钟,400-600g); 9.[可选]细胞活性染料染色细胞; 10.用对应的缓冲液(或PBS)重悬细胞; 11.利用流式细胞仪分析细胞。 细胞表面染色操作流程1.制备单细胞悬液; 2.[可选]阻断Fc受体(10-20分钟); 3.加入抗体,2-8°C孵育(30分钟); 4.用流式细胞染色缓冲液(或PBS)洗涤(1-2x5分钟,350g); 5.如非荧光染料直标抗体加入荧光二抗,2-8°C孵育(30分钟); 6.用流式细胞染色缓冲液洗涤(1-2x5分钟,350g); 7.[可选]细胞活性染料染色细胞; 8.用流式细胞染色缓冲液(或PBS)重悬细胞; 9.利用流式细胞仪分析细胞。
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